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陈浩理所当然地回答:“双重氯仿抽提,加糖原共沉淀啊,我们老大提出来的这个方法,牺牲点第一次的上清液体积,再加一次氯仿离心,蛋白就全沉下去了,然后补5微升糖原把rna析出来,整个流程下来四十分钟就搞定了,效果很好呀,为什么要搞得像你那么复杂?”
孙长明:“?”
反应了半天后,孙长明抗拒道:“不对,氯仿确实能去蛋白,但你抽提两次,水相里的rna早就流失得七七八八了,就算加了糖原,浓度也绝对达不到下游要求,纯度就更别提了,能过15都算你们运气好。”
“可是……”蔡卓群在旁边忍不住插嘴。
“没什么可是的,科研需要的是严谨,你们用这种糙办法,跑出来的数据全都是假阳性或者直接假阴性。”
就在这时,很巧嗷。
离心机跑的新一批内容出来了。
陈浩道:“孙教授,数据是不是真的,测一下就知道了。”
蔡卓群立刻上前,打开离心机盖,加入无酶水,溶解。
nanodrop分光光度计前。
1微升的样本滴入基座。
测量!
屏幕刷新,一排数据跳了出来。
浓度:145 ng/ul。
a260/280:195。
a260/230:203。
孙长明:“啊?”
18到20是rna纯度的完美区间。
他引以为傲、耗时四小时、加了各种昂贵试剂才跑出的175。
可这个呢?
195是什么鬼啊!
“换一管,再测。”孙长明不信邪。
蔡卓群依言换了第二个样本。
浓度:138 ng/ul。a260/280:192。
第三管。
浓度:151 ng/ul。a260/280:196。
极其稳定的高纯度,完美的数据重现性,没有任何悬念的绝对碾压。
孙长明,不嘻嘻。
陈浩在旁边补了一刀:“孙教授,你看,四十分钟提出来的,效果是不是比你那个好多了?”
杨煦绷不住了,哈哈大笑:“老孙啊,你那个蛋白酶k水浴一小时的方法,确实挺有创意的,就是费时费力还费钱,没关系,坚持你的想法,相信你一定行!”
孙长明沉默半天,最后也客气的笑道:
“嗯……数据还算凑合吧,不过,不同组织的样本特性不一样,你们这套方法
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